Page 437 - เอกสารประกอบการประชุมวิชาการ ศูนย์วิจัยพืชไร่ขอนแก่น ประจำปี 2563 เล่มที่ 1

432

วิธีด าเนินการและอุปกรณ์

พืชที่ใช้ในการทดลอง : อ้อยพันธุ์ขอนแก่น 3
วิธีการ : แบ่งเป็น 2 ขั้นตอน

ขั นตอนที่ 1 ตรวจติดตามปริมาณเชื้อไฟโตพลาสมาโรคใบขาวอ้อยในอ้อยรุ่นที่ 1 และในรุ่นอ้อยตอ

ในแปลงทดลองของศูนย์วิจัยพืชไร่ขอนแก่น
ั
ื
วิธีด าเนินการทดลอง : ส ารวจและคดเลอกต้นอ้อยในแปลงทดลองใน ศวร.ขก. ประมาณ
ุ
ึ

ิ
ี่

ี

50 กอทมีอาการและไม่มีอาการใบขาว นับจานวนลา/หน่อในกอ ตดเครื่องหมายทกลา บันทกอาการสใบ

้
เก็บใบตาแหน่งท 3 จากยอด บันทกอาการสใบ ตรวจปริมาณเชอใบขาวดวยเทคนิค PCR ตามวิธีการของ
ี่
ื้
ี
ึ
ศจรัตน์และคณะ (2558) ทาการตรวจปริมาณเชอใบขาวทั้งสน 3 อายุ : 3 เดอน, 6 เดอน, 9 เดอน ในอ้อย
ื
ื
ื
ิ
ิ้

ื้
ุ

ี
ึ
ั
ี่
่
ี่
รุ่นท 1 และรุ่นอ้อยตอจานวน1-2 รุ่น บันทกอาการสใบ สภาพอากาศ และการจดการแปลงในชวงทเก็บ
ตัวอย่าง
ื้
้
ขั นตอนที่ 2 ตรวจตดตามการถ่ายทอดปริมาณเชอไฟโตพลาสมาโรคใบขาวในอ้อยทไดจากการช า
ี่
ิ
ข้อตาจากล าที่ได้จากการปลูกในสภาพแปลง

ี่

ื

ั
ิ

วธีดาเนินการทดลอง : คดเลอกลาอ้อยจากขั้นตอนท 1 ชาข้อตาในถุงเพาะจานวน 100

ี่
ื้
ึ
่

ี่
ข้อ บันทกหมายเลขลาทไดในขั้นตอนท 1 ตาแหน่งข้อของแตละลา เมื่องอกใบ ทาการตรวจปริมาณเชอใบ
้

ขาวตามวิธีการในขั้นตอนที่ 1
การบันทึกข้อมูล
จ านวนหน่อ/ ล าต่อกอ อาการสีใบ ปริมาณเชื้อใบขาวตรวจด้วยเทคนิค PCR
สถานที่ทดลอง ศูนย์วิจัยพืชไร่ขอนแก่น
ระยะเวลาเริ่มต้นและสิ นสุด : 2559-2564

ผลการทดลองและวิจารณ์
จากการส ารวจแปลงใน ศวร.ขก. และติดเครื่องหมายกอที่ต้องการทดสอบที่มีอาการใบขาว จ านวน
20 กอ เก็บตวอย่างใบน าไปสกัด DNA ตรวจ PCR ตนพ่อแม่ 20 ตวอย่าง พบว่ามีปริมาณเชอในใบระดบ
ื้
ั
ั
้
ั
่
ตั้งแตสีฟ้าถึงสีเหลือง (<0.5-10copies/ul ในดีเอ็นเอพืช 25 นาโนกรัม) (ภาคผนวก ตารางที่ 1) และเมื่อน า
ลาทไดไปเพาะข้อตา เมื่อตนอ้อยอายุได 2 เดอน เก็บตวอย่างใบทไดจากแตละลาไปตรวจปริมาณเชอดวย
้
ื้
้
้
ี่
ั
้
ี่
้

ื
่

่
ั

ี่
เทคนิค PCR พบว่ามีการกระจายของเชื้อและปริมาณในระดบทสอดคล้องกันกับการตรวจที่ใบของแตละลา
ั
ยกเว้นล าที่ 16 เนื่องจากตัวอย่างที่ได้มีปริมาณเชื้ออยู่ในระดบตา จึงท าให้ไม่เห็นการสะสมของเชื้อทชัดเจน
่
ี่
ในล า