Page 13 - สัตว์เศรษฐกิจ Emagazine 886
P. 13

การตอบสนองภูมิคุ้มกัน และประสิทธิภาพของวัคซีนป้องกันโรคกลุ่มอาการระบบสืบพันธุ์ และระบบทางเดินหายใจสุกร ชนิดเชื้อเป็น
                    (HIPRA, SPAIN) ที่ฉีดด้วยวิธีเข้าผิวหนัง (intradermal) และเข้ากล้าม (intramuscular) ในสุกร

                                    ดร. อรรถกร มาดาป้อง ผศ. ดร. เดชฤทธิ์ นิลอุบล และคณะ

                              ภาควิชาจุลชีววิทยา คณะสัตวแพทยศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย ประเทศไทย
                             ี
                          ี
                         เรยบเรยงโดย เรองอุไร กจโชดก (สพ.บ., วท.ม.,เกียรตบัตรทางการตลาด ) และทมวชาการบรการและการตลาดสกร
                                                                          ิ
                                                                                ิ
                                                         ิ
                                                                        ี
                                        ิ
                                  ื
                                                                                           ุ
       บทนำ                                             (B) 1400  ปรมาณเชื้อ PRRSV (US) ในซีร่ม  • กลุ่มที่ไม่ฉีดวัคซีนมีปริมาณเชื้อ

                                                                       Type 2 PRRSV RNA in serum
                                                                   ิ
                                                                                    ั
                        ์
      ▪ การปองกนโรคพีอารอารเอส (PRRS) จากการฉีดวัคซีนด้วยวิธีเข้ากล้าม   1200                    PRRSV (US) ในซีรั่มสูงที่สุด ณ วันที่
                      ์
               ั
            ้
         (intramuscular, IM) เป็นวิธีที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลาย แต่ในปัจจุบันการฉีดวัคซีน  1000  a  7 หลังพ่นเชื้อพิษทับ
         ด้วยวิธีเข้าผิวหนัง (intradermal, ID) เรมได้รบความนิยมมากขน เพราะเป็นบรเวณทม ่ ี  ี  PRRSV genomic copies/ml  800  VacIM/PRRS2 • กลุ่มที่ฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS
                                         ้
                             ่
                             ิ
                                         ึ
                                                 ิ
                                ั
                                                                                          VacID/PRRS2
                                                                                          NV/PRRSV2
         เซลล์เม็ดเลือดขาวที่ท าหน้าที่ในการดักจับแอนติเจนและน าเสนอแอนติเจนเข้าสู่ต่อม  600  b c  a  VacIM/PRRS1+2  (HIPRA, SPAIN) ทั้ง IM  และ ID  มี
                                                                                          VacID/PRRS1+2
                                                                                          NV/PRRS1+2
         น้ าเหลืองจ านวนมาก อีกทั้งการฉีดเข้าผิวหนัง (ID) สามารถลดการเกิดบาดแผลและลด  400  d  b  NV/Unch  ปริมาณเชื้อ PRRSV (US) ในซีรั่ม
         ความเจ็บปวดเมื่อเทียบกับการฉีดเข้ากล้าม (IM) อีกด้วย  200       Challenge   c           น้อยกว่ากลุ่มที่ไม่ท าวัคซีน ในวันที่ 7
                ์
       จุดประสงคกำรทดลอง                                 0 0 DPV  7 DPV  14 DPV  21 DPV  28 DPV  35 DPV  3 DPC  7 DPC e  14 DPC d  35 DPC  และ 14 หลังพ่นเชื้อพิษทับ
                                                                   Days post-vaccination (DPV) / Days post-challenge (DPC)
       ▪ เพื่อทดสอบการกระตุ้นภูมิคุ้มกันและประสิทธิภาพของวัคซีนปองกนโรค PRRS ชนิด  (B)  Type 2 PRRSV RNA in nasal swabs
                                            ั
                                         ้
                                                        1400                                   • กลุ่มที่ไม่ฉีดวัคซีน พบปริมาณเชื้อ
                                                                                     ั
                                                                                  ั
                                                               ิ
         เชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) เมื่อฉีดด้วยวิธีเข้ากล้าม (IM) หรือเข้าผิวหนัง (ID) ต่อการติด  ปรมาณเชื้อ PRRSV (US) ในสารคดหล่งจมูก  PRRSV (US) ในสารคัดหลั่งจมูกสูง
                                                        1200
         เชื้อไวรัส PRRS สายพันธุ์ยุโรปและอเมริกาเหนือ (HP-PRRSV) ในสุกร  (nasal swab)           ที่สุด ณ วันที่ 7 หลังพ่นเชื้อพิษทับ
       วัสดุอุปกรณ และวิธกำรทดลอง                       1000 800                 a        VacIM/PRRS2  • กลุ่มที่ฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS
                       ี
                 ์
       ▪ แบ่งสุกรอายุ 3 สัปดาห์ จ านวน 42 ตัว ออกเป็น 7 กลุ่ม กลุ่มละ 6 ตัว ท าการฉีดวัคซีน   PRRSV genomic copies/ml  600  b  VacID/PRRS2  (HIPRA, SPAIN) ทั้ง IM และ ID มี
                                                                                          NV/PRRS2
                                                                                          VacIM/PRRS1+2
                                                                                                 ปริมาณเชื้อ PRRSV (US) ในสารคัด
                                                                                          VacID/PRRS1+2
         เก็บตัวอย่างเลือด ชั่งน้ าหนัก พ่นพิษทับด้วยเชื้อไวรัส และท าการุณยฆาต ดังภาพ    NV/PRRS1+2
                                                                                          NV/Unch
                                                         400                  a   c              หลั่งจมูกน้อยกว่ากลุ่มที่ไม่ฉีดวัคซีน
                     ฉีดวัคซีน                                                b   c  a
                                                                         Challenge  d            ในวันที่ 7 และ 14 หลังพ่นเชื้อพิษ
                                                         200
                                                                              b      b
                                                                              c                  ทับ
                                                         0                    c   e  c
                                                         0 DPV  7 DPV  14 DPV  21 DPV  28 DPV  35 DPV  3 DPC  7 DPC  14 DPC  35 DPC
                                                                   Days post-vaccination (DPC) / Days post-challenge (DPC)
                                                                      Homologous virus recall (vaccine virus)
                                                         20
                                                                  ไซโตไคน์ อินเตอร์ลิวคิน-10 (IL-10)  • กลุ่มที่ฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS
                                                               (ไซโตไคน์ที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการกดภูมิคุ้มกัน)  (HIPRA, SPAIN) ด้วยวิธี ID สามารถ
                                                         15                                      กระตุ้นการสร้าง IL-10 ได้ช้ากว่า
                                                        Vaccine virus-specific IL-10 (pg/ml)  10  a a  a a a a  a a  VacIM/PRRS2  (21 วันหลังฉีดวัคซีน) กลุ่มที่ฉีดด้วย
                                                                                          VacID/PRRS2
        ผลกำรทดลอง                                                                        VacIM/PRRS1+2  IM (7 วันหลังฉีดวัคซีน) อีกทั้งยังมี
                                                                                          NV/PRRS2
                                                                                          VacID/PRRS1+2
                                                                                          NV/PRRS1+2
         (A)              PRRSV-specific antibodies (IDEXX)                       b       NV/Unch  ระดับที่ต่ ากว่าและลดลงอย่าง
          2.8                                            5                        b     a
                   การตรวจแอนติบอดีที่จ าเพาะต่อ PRRSV (IDEXX)                          a        รวดเร็วเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มที่ฉีด
          2.4                Challenge                          a           b
                                                                      b     b b   c c   b b      ด้วย IM
                                                                      b
          2.0                         a                         b                 c     b
                          a   a       a                  0            b                 b
                                          a
                              a   a           a          0     7     14    21    28    35
                       a      a                                      Days post-vaccination (DPV)
          1.6             a   a   a a a  a  a a  a  VacIM/PRRS2
         S/P ratio     a  a a         a   a   a a  VacID/PRRS2
                                                 NV/PRRS2
                                                 VacIM/PRRS1+2
          1.2      a a  a a                      VacID/PRRS1+2  กลุ่มทดลอง   Macroscopic scores  Microscopic lesion
                                                 NV/PRRS1+2
                   a                             NV/Unch
                   a                          b
          0.8                                                          (การสังเกตด้วยตาเปล่า)  (ผ่านกล้องจุลทรรศน์)
                                              b
                                          b
          0.4                                  Cut-off                7 DPC *    35 DPC       7 DPC *     35 DPC
                                          b
                   b   b  b   b   b   b   c   c
          0.0                                          VacIM/PRRS2   58.02.0 c   00        1.620.11 b   00
          0 DPV  7 DPV  14 DPV  21 DPV  28 DPV  35 DPV  3 DPC  7 DPC  14 DPC  35 DPC
                      Days post-vaccination (DPV) / Days post-challenge (DPC)  VacID/PRRS2  27.32.4 e  00  1.330.14 c  00
        การฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) ทั้ง IM และ ID สามารถกระตุ้น
              การตอบสนองของแอนติบอดีได้รวดเร็วภายใน 14 วันหลังฉีดวัคซีน   NV/PRRS2  71.33.2 b  2.01.0  2.380.11 a  00
              (พบครั้งแรกที่ 7 วันหลังฉีดวัคซีน) เมื่อตรวจด้วย IDEXX ELISA  VacIM/PRRS1+2  62.32.4 c  2.00.3  1.880.06 b  00
         (A)         PRRSV-specific neutralizing antibodies aginst homologous viurs (vaccine virus)  VacID/PRRS1+2  41.07.0 d  1.00.3  1.510.10 c  00
          8
                      การตรวจนิวทรัลไลซิ่งแอนติบอดี  a  NV/PRRS1+2   84.03.5 a  2.01.0     2.370.07 a   00
                        ที่จ าเพาะต่อไวรัสวัคซีน  a    NV/Unch         00        00          00         00
          6
                                     a a  a a  b
                               Challenge  a              กลุ่มที่ฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) ทั้ง IM และ ID มีคะแนนรอยโรคปอดจากการสังเกต
                        a   a                 b
                        a   a        b    a      VacIM/PRRS2
         Titers (2 n )  4   a    a   b           VacID/PRRS2  ด้วยตาเปล่า และผ่านกล้องจุลทรรศน์ น้อยกว่ากลุ่มที่ไม่ฉีดวัคซีน ในวันที่ 7 และ 35 วัน หลังพ่นเชื้อพิษทับ โดยกลุ่มที่ฉีด
                                                 NV/PRRS2
                                                 VacIM/PRRS1+2
                        b        a a             VacID/PRRS1+2
                                 a               NV/PRRS1+2
                        b   b                    NV/Unch  ด้วยวิธี ID มีคะแนนรอยโรคปอดน้อยที่สุด ในวันที่ 7 หลังพ่นเชื้อพิษทับ
                                                                             สรุปผลกำรทดลอง
          2
                                              c
                                              c
                        c   c    b   c   b    d
          0                                            ▪ วัคซีนป้องกันโรคPRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) เมื่อฉีดด้วยวิธีเข้ากล้าม (IM) และเข้าผิวหนัง
          0 DPV  7 DPV  14 DPV  21 DPV  28 DPV  35 DPV  7 DPC  14 DPC  35 DPC
                     Days post-vaccination (DPV) / Days-post challenge (DPC)
        การฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) ทั้ง IM และ ID สามารถกระตุ้น  (ID) สามารถกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของสุกรได้
             นิวทรัลไลซิ่งแอนติบอดีที่จ าเพาะต่อไวรัสวัคซีนที่ 21 วันหลังฉีดวัคซีน  ✓ กระตุ้นการตอบสนองของแอนติบอดีได้รวดเร็วภายใน 14 วันหลังฉีดวัคซีน
                                                         ✓ กระตุ้นการตอบสนองของนิวทรัลไลซิ่งแอนติบอดีได้ใน 21 วันหลังฉีดวัคซีน
                จ านวนเซลล์ที่สร้างไซโตไคน์ IFN-     เมื่อกระตุ้นด้วยไวรัสวัคซีน  ✓ สามารถกระตุ้นเซลล์ที่สร้าง IFN-γ ได้เร็วภายใน 28 วันหลังฉีดวัคซีน โดยกลุ่มที่ฉีด ID สามารถกระตุ้นได้เร็วกว่า กลุ่มที่ฉีด IM
              (เกี่ยวข้องกับการท างานของภูมิคุ้มกันชนิดพึ่งเซลล์เพื่อท าลายเชื้อไวรัส)  และมีระดับที่สูงกว่า
                                                       ▪ วัคซีนป้องกันโรคPRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) เมื่อฉีดด้วยวิธีเข้ากล้าม (IM) และเข้าผิวหนัง
                                                          (ID) ให้ความคุ้มโรคข้ามสายพันธุ์ (Partial heterologous protection) ต่อเชื้อไวรัส PRRS
                                                         ✓ สุกรที่ฉีดวัคซีนสามารถลดปริมาณเชื้อ PRRSV ในกระแสเลือด ในสารคัดหลั่งจมูกและสามารถลดรอยโรคที่ปอดภายหลังจากพ่นพิษ
                                                           ทับด้วยเชื้อ PRRSV (ทั้ง EU และ US) เมื่อเทียบกับกลุ่มที่ไม่ฉีดวัคซีน
                                                       ▪ วัคซีนป้องกันโรคPRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) เมื่อฉีดด้วยวิธีเข้าผิวหนัง (ID) เป็นอีกหนึ่ง
                                                          ตัวเลือกที่ดี
                                                         ✓ มีการกระตุ้นการสร้าง IL-10 ที่ช้ากว่าและมีระดับที่น้อยกว่าเมื่อเทียบกับกลุ่มที่ฉีดเข้าผิวหนัง (IM)
        กลุ่มที่ฉีดวัคซีนป้องกันโรค PRRS ชนิดเชื้อเป็น (HIPRA, SPAIN) ด้วยวิธี ID พปริมาณ  ✓ มีการกระตุ้นเซลล์ที่สร้างไซโตไคน์ IFN-     ที่เร็วกว่าและมีระดับที่สูงกว่าเมื่อเทียบกับกลุ่มที่ฉีดเข้าผิวหนัง (IM)
      เซลล์ที่สร้าง IFN-     ได้เร็วกว่า (ภายใน 28 วันหลังฉีดวัคซีน) และมีระดับที่สูงกว่ากลุ่มที่ฉีด IM
   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17   18