Page 198 - Hemostasis Bahan Ajar Teknologi Laboratorium Medik (TLM) by Adang Durachim, S.Pd,, M.Kes. Dewi Astuti, S.Si., M.Biomed. (z-lib.org) (1)

D. PROSEDUR PEMERIKSAAN AGREGASI TROMBOSIT

1. Pembuatan Platelet Rich Plasma (RPP) dan Platelet poor Plasma (PPP)
Sebanyak 9,0 ml darah dimasukkan kedalam tabung sitrat yang berisi 1 mL Na
sitrat 3.2%. Pembuatan PRP dilakukan dengan mensentrifugasi darah dengan
kecepatan 1000 rpm selama 15 menit atau 100 g selama 15 menit. Plasma yang

diperoleh adalah PRP, kemudian dipindahkan ke dalam tabung plastik. Jumlah
trombosit PRP harus 200.000-300.000/ µL. Jika jumlah trombosit <100.000/µL
sulit untuk melakukan setting optical baseline.
Sisa darah dalam tabung sitrat yang telah dipisahkan PRPnya, disentrifus lagi

3500 rpm selama 15 menit atau 2400 g selama 20 menit. Plasma yang diperoleh
adalah PPP. Kemudian dimasukkan 500 µL kedalam kuvet pemeriksaan.
Pemeriksaan
a. Nyalakan alat, tunggu sampai suhu incubation wells pada alat mencapai
0
suhu 37 C. Nyalakan komputer, ketik data pasien.
b. Siapkan PRP dan PPP. Masukkan 5 kuvet kedalam lubang incubation
wells, 4 kuvet diisi dengan PRP sebanyak 500 µL dan 1 kuvet sebagai
blanko diisi dengan PPP sebanyak 500 µL.

c. 4 kuvet yang berisi 500 µL PRP dimasukkan sebutir magnet yang
berfungsi sebagai pengaduk.
0
d. Kelima kuvet tersebut diinkubasi selama 3 menit pada suhu 37 C.
e. Satu kuvet yang berisi PPP dan stir bar dipindahkan ke lubang optical

chamber, kemudian PPP set switch ditekan ke angka 1.
f. 4 kuvet yang berisi PRP secara berurutan dimasukkan ke lubang optical
chamber PRP kemudian tombol stirrer dijalankan.
0
g. Inkubasi kelima kuvet tersebut selama 3 menit pada suhu 37 C.
h. Buat garis baseline untuk menentukan batas atas dan bawah pada trace
1,2,3 dan 4 pada agregometer.
i. Siapkan reagen ADP kemudian masukkan larutan ADP berbagai
konsentrasi sebagai berikut :

Tabung PRP 500 µL (Trace 1) ADP, Konsentrasi 10 µM 5 µL
Tabung PRP 500 µL (Trace 2) ADP, Konsentrasi 5 µM 5 µL

Tabung PRP 500 µL (Trace 3) ADP, Konsentrasi 2 µM 5 µL
Tabung PRP 500 µL (Trace 4) ADP, Konsentrasi 1 µM 5 µL
j. Biarkan grafik berjalan selama 13 menit
k. Hasil agregasi akan tampak pada layar secara otomatis dinyatakan dalam

persen.

Hemostatis 191