Page 77 - ธรรมชาติของสิ่งมีชีวิต

ิ
ชีววทยาพื้นฐาน ม.4 - 71 -

การทดสอบโปรตีน
Biuret reaction เป็นปฏิกิริยาเฉพาะส าหรับการทดสอบโปรตีน และผลิตภัณฑ์ที่เกิดจากการไฮโดร

ั
ไลส์โปรตีนที่ยังมีพนธะเพปไทด์อยู่ เช่น protose, peptone, tripeptide โดยน ามาท าปฏิกิริยากับ
สารละลาย CuSO4 ในเบส (NaOH) ซึ่งจะเกิดปฏิกิริยาให้สีต่าง ๆ กัน ตั้งแต่สีน้ าเงิน หรือม่วงจนถึงสีชมพู
ั
ซึ่งสีเหล่านี้เป็นสีของสารประกอบเชิงซ้อนระหว่างไอออนของทองแดง กับสารที่มีพนธะเพปไทด์ตั้งแต่ 2
ั
พนธะขึ้นไป เรียกปฏิกิริยาการทดสอบโปรตีนดังกล่าวนี้ว่า Biuret reaction ถ้าเป็นโปรตีนจะได้สีน้ าเงินปน
ู
ม่วง และถ้าเป็นผลิตภัณฑ์ที่เกิดจากการไฮโดรไลส์โปรตีนจะให้สีต่าง ๆ กัน ตั้งแต่สีม่วงจนถึงสีชมพ ทั้งนี้
ิ
ขึ้นอยู่กับขนาดของโมเลกุล ส าหรับกรดอะมิโนจะไม่เกดปฏิกิริยานี้ และจะให้ผลทดสอบเป็นไมมีสีเมื่อทดสอบ
่
ด้วยวิธีนี้ เนื่องจากกรดอะมิโนไม่มีพนธะเพปไทด์ หรือเมื่อโปรตีนอยู่ในสารละลายที่เป็นด่างและมีคอปเปอร์
ั
2+
(II) ไอออน (Cu ) อยู่ด้วย สีม่วงนี้เป็นสีของสารประกอบเชิงซ้อนที่มีชื่อว่า biuret complex ดังรูปที่ 1 ซึ่ง

สารประกอบเชิงซ้อน biuret complex
2+
เกิดจากการท าปฏิกิริยาระหว่าง Cu กับ อะตอมของไนโตรเจนในโมเลกุลของโปรตีนนั่นเอง ดังนั้น
Biuret reaction จึงเป็นปฏิกิริยาที่ใช้ทดสอบ โปรตีนและกรดอะมิโนได้ รวมทั้งสามารถใช้ติดตามขั้นตอนการ
เกิดไฮโดรไลส์ของโปรตีนได้โดย ดูจาก การเปลี่ยนแปลงสีของสารละลาย

กิจกรรมการการทดลอง:การทดสอบโปรตีนในสารอาหาร
ี
อุปกรณ์และสารเคม
รายการ ปริมาณต่อกลุ่ม
1. ไข่ขาว ไข่แดง นมถั่วเหลือง ปลาเส้นทาโร่ 2 ml
3
2. สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์เข้มข้น 2.5 mol / dm 4 ml
3
3
3. สารละลายคอปเปอร์ (II) ซัลเฟต (CuSO4) 0.1 mol / dm 1 cm
3
4. บีกเกอร์ขนาด 50 cm 2 ใบ
5. หลอดทดลองขนาดเล็ก 5 หลอด
6. หลอดหยด 2 อัน